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病原監(jiān)控專題丨susMDCK懸浮細胞分離流感病毒:與繁重工作說拜拜

流感監(jiān)控網(wǎng)絡實驗室常用MDCK細胞系來進行季節(jié)性流感病毒的分離

2022-02-21

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流感監(jiān)控網(wǎng)絡實驗室常用MDCK細胞系來進行季節(jié)性流感病毒的分離,該細胞系是由Madin和Darby在1958年從美國Cocker Spaniel母曲架犬的腎臟組織分離培育出的,通常是以貼壁方式生長的上皮樣細胞。由于其病毒感染效率高,增值快,且不易變異,MDCK細胞系廣泛應用于多種病毒的分離培養(yǎng),常被用于疫苗生產(chǎn)。

傳統(tǒng)的MDCK細胞系培養(yǎng),采用有血清的貼壁細胞培養(yǎng)方式。然而血清成分復雜,含有對細胞有害的成分,后期產(chǎn)物分離純化難度大。另外,血清來源有限,價格昂貴,生產(chǎn)成本高;而且血清的質(zhì)量因動物個體、血清產(chǎn)地、生產(chǎn)批號不同而產(chǎn)生波動,使得實驗和生產(chǎn)難以實現(xiàn)標準化。


通過對傳統(tǒng)MDCK細胞的無血清培養(yǎng)馴化,加上高表達的表面受體——α-2,6Gal Sa受體蛋白,可以使該細胞系與流感病毒表面HA基因更好地結(jié)合,達到高效分離流感病毒的目的。目前,懸浮細胞分離病毒已廣泛被使用。susMDCK懸浮細胞生長不依賴支持物表面,由于缺乏粘附分子的表達,在培養(yǎng)基中便自然呈現(xiàn)懸浮狀態(tài)。因此在細胞培養(yǎng)與傳代時,使用無血清培養(yǎng)液,并且只需要直接稀釋或離心稀釋,無需胰酶消化。相較于傳統(tǒng)MDCK貼壁細胞具有操作簡便,分離率高,分離周期短的優(yōu)勢。


sus-MDCK懸浮細胞

分離病毒的優(yōu)勢

操作便捷

細胞傳代——只需稀釋,無需胰酶消化,且無需牛血清,使用susMDCK懸浮細胞專用的M-SUS培養(yǎng)液即可;


標本接種——無需洗滌細胞,無病毒吸附過程,直接加入標本培養(yǎng);


病毒收獲和鑒定——隨時可取出進行血凝試驗,若滴度小于8,則可以繼續(xù)培養(yǎng),直到滴度滿足要求。


效果顯著

懸浮的susMDCK細胞通過增加病毒吸附表面積和流感病毒的受體,提高了吸附病毒的能力。對H1N1pdm09亞型和乙型流感病毒,尤其是對近年來因基因位點發(fā)生變異導致很難分離的季節(jié)性H3亞型流感病毒,分離培養(yǎng)的優(yōu)勢十分顯著(如圖1)。


另外,與貼壁細胞相比可以顯著提高病毒分離培養(yǎng)的陽性率和病毒滴度(如圖2)。


圖1 H3N2懸浮細胞培養(yǎng)物的血凝實驗結(jié)果


圖2 兩種類型細胞對隨機樣本

分離培養(yǎng)陽性率的比較


設備簡單
只需培養(yǎng)箱、搖床和計數(shù)儀。



高效分離流感病毒的

susMDCK懸浮細胞產(chǎn)品


為了更好的服務于流感病毒分離培養(yǎng)工作,上海伯杰醫(yī)療科技有限公司精心定制了不同的懸浮細胞產(chǎn)品,以滿足您的全方位需求!


方案一:流感病毒高效細胞分離培養(yǎng)試劑盒

一套囊括懸浮細胞培養(yǎng)所需儀器、試劑及耗材的實驗包



方案二:susMDCK懸浮細胞成品管

無需試劑耗材,可直接進行病毒分離培養(yǎng)。




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